Электрофорез: что это такое, для чего он нужен и как это делается

Контент:

Электрофорез — это лабораторный метод, выполняемый с целью разделения молекул в зависимости от их размера и электрического заряда, чтобы можно было проводить диагностику заболеваний, проверять экспрессию белков или идентифицировать микроорганизмы.

Электрофорез — простая и недорогая процедура, используемая в лабораторных и исследовательских проектах. В зависимости от цели электрофореза может потребоваться проведение других анализов и обследований, например, для постановки диагноза.

для чего это

Электрофорез можно проводить с разными целями, как в исследовательских проектах, так и в диагностике, так как это простой и малозатратный метод. Таким образом, электрофорез можно проводить для:

  • Идентифицируйте вирусы, грибки, бактерии и паразиты, это приложение чаще используется в исследовательских проектах;
  • тест на отцовство;
  • Проверить экспрессию белков;
  • Выявление мутаций, которые могут быть полезны, например, при диагностике лейкемии;
  • Анализировать типы циркулирующего гемоглобина, что полезно при диагностике серповидноклеточной анемии;
  • Оцените количество белка, присутствующего в крови.

В зависимости от цели электрофореза может потребоваться проведение других дополнительных тестов, чтобы врач мог поставить диагноз.

как это делается

Электрофорез является лабораторным методом, и для его проведения необходимо приготовить агарозный или полиакриламидный гель, в зависимости от цели метода, буферный раствор, ванну для электрофореза, маркер молекулярной массы и вещество, позволяющее визуализировать. образцы при воздействии УФ или светодиодного света. После приготовления и затвердевания геля технику можно выполнять следующим образом:

  1. Поместите каждый образец в лунку геля , смешав небольшое количество маркера молекулярной массы;
  2. Поместите в одну из лунок положительный контроль , представляющий собой известное вещество, а в другую лунку — отрицательный контроль, чтобы убедиться в достоверности реакции. В обеих лунках также должен присутствовать маркер молекулярной массы;
  3. Поместите гель в резервуар для электрофореза , если нет, со специальным буферным раствором и включите устройство, чтобы генерировался электрический ток, способный генерировать разность потенциалов и разделять частицы в соответствии с их зарядом и размером. Время проведения электрофореза варьируется в зависимости от цели процедуры и может длиться до 1 часа;
  4. Просмотрите результат электрофореза через трансиллюминатор . Когда гель помещается под УФ или светодиодный свет, можно визуализировать рисунок полос: чем крупнее молекула, тем меньше ее миграция, приближаясь к лунке, а чем светлее молекула, тем больше миграционный потенциал. .

Для подтверждения реакции необходимо визуализировать полосы положительного контроля и убедиться, что в отрицательном контроле ничего не визуализируется, иначе это свидетельствует о контаминации, и весь процесс необходимо повторить.

Виды электрофореза

Электрофорез можно проводить для разных целей и, в зависимости от его назначения, можно использовать разные типы геля, наиболее распространенными из которых являются полиакриламидный и агарозный.

Электрофорез для выявления микроорганизмов чаще проводят в исследовательских лабораториях, однако в диагностических целях электрофорез может применяться для выявления гематологических заболеваний и заболеваний, развивающихся с увеличением количества белков, являясь основными видами электрофореза:

1. Электрофорез гемоглобина

Электрофорез гемоглобина — это лабораторный метод, применяемый для выявления различных типов гемоглобина, циркулирующих в крови, позволяющий выявить наличие заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина. Тип гемоглобина определяется с помощью электрофореза при определенном рН, в идеале от 8,0 до 9,0, и проверяется картина полос, которую можно сравнить с нормальной картиной, что позволяет идентифицировать наличие аномальных гемоглобинов.

Для чего он используется: электрофорез гемоглобина используется для исследования и диагностики заболеваний, связанных с синтезом гемоглобина, таких как серповидно-клеточная анемия и болезнь гемоглобина С, а также полезен для дифференциации талассемии. Узнайте, как интерпретировать электрофорез гемоглобина.

2. Белковый электрофорез

Электрофорез белков — это тест, назначаемый врачом для оценки количества циркулирующих белков в крови и, таким образом, выявления заболеваний. Этот тест проводится из образца крови, который центрифугируется для получения плазмы, которая является частью крови, состоящей, среди прочего, из белков.

После электрофореза можно визуализировать картину полос, а затем график, на котором указано количество каждой белковой фракции, что необходимо для диагностики.

Для чего он используется: Электрофорез белков позволяет врачу исследовать возникновение множественной миеломы, обезвоживания, цирроза печени, воспалений, заболеваний печени, панкреатита, волчанки и гипертонии в соответствии с рисунком полос и графиком, представленным в отчете об обследовании.

Поймите, как это делается и как понять результат электрофореза белка.